求助 - 血清、血浆、白细胞DNA提取方法 (Jul/11/2004 )
请问血清、血浆、WBC中DNA的提取protocal下面这个可以吗
血清、血浆提取DNA步骤
1.融化血样。
2.分装 每管300ul+450ulDNA提取液,每管加5ulRNA酶(20ug/ml)。
3. 37度温浴1小时,加蛋白酶K5ul(20mg/ml),振荡过夜。
4.加等体积酚,混匀,4度,离心12000转/分,15’。
5. 加酚:氯仿(1:1)等体积,充分混匀,离心12000转/分,15’。
6.加氯仿,等体积,混匀,离心12000转/分,15’。
7.将上层水相转移至一离心管中,加2倍体积无水乙醇+1/10体积10m醋酸钠。
8.-20度静置。
9.4度离心,12000转/分,15’。
10.弃上清,75%乙醇洗,空气干燥,+TE液 过夜
WBC是不是应加上一部细胞裂解的步骤。许多书上的方法不尽相同,但大同小异。
-cristof-
你的血样是抗凝的还是不抗凝的,如果是抗凝血,照你的方法提没有问题,如果是凝血块,
就麻烦些。
-postdoc-